技术原理

       SILAC(Stable Isotope Labeling with Amino acids in Cell culture) 体内稳定同位素标记技术是一种有效的、稳定的针对细胞系蛋白质组定量变化的解决方案。
       通过采用天然同位素（轻型）或稳定同位素（重型）标记取代培养基中的必需氨基酸（通常为Lys和Arg），细胞经>6个倍增周期后，稳定同位素标记氨基酸完全取代细胞新合成的蛋白质的相应氨基酸。不同标记的裂解蛋白按细胞数或蛋白量等量混合，经裂解、组分分离后进行质谱鉴定。

技术优势

1. 平行性好，消除了样品制备、质谱检测等各阶段可能引入的定量误差
2. 标记效果稳定，且标记效率>98%
3. 通过HPLC组分分离的方法，鉴定通量>8000

实验流程

参考文献

[1] Georg Kustatscher, Nadia Hégarat, Juri Rappsilber and et al. Proteomics of a fuzzy organelle: interphase chromatin. EMBO Journal. 2014, 33, 648–664
[2] Phyllis SY Chong, Jianbiao Zhou, Wee Joo Chng, et al. LEO1 is regulated by PRL-3 and mediates its oncogenic properties in Acute Myeloid Leukemia. Cancer Research. 2014, 74
[3] Munday DC, Emmott E, Hiscox JA and et al. Quantitative proteomic analysis of A549 cells infected with human respiratory syncytial virus. Mol Cell Proteomics. 2010, 9(11):2438-2459